新型κ-卡拉胶酶降解卡拉胶多糖产物的ESI-MS及MS~n分析

【作者】 孙玉姣； 刘洋； 姜宽； 王承健； 王仲孚； 黄琳娟；

【机构】 西北大学生命科学学院,西部资源生物与生物技术教育部重点实验室；

【摘要】 κ-卡拉胶是从红藻中提取的一类硫酸化多糖,在结构上是一种主要由1,4-连接-3,6-内醚-α-D-半乳糖(An)与1,3-连接-4-硫酸基-β-D-半乳糖(G4S)交替连接而形成的线性高分子聚合物[1]。κ-卡拉胶酶可以随机水解κ-卡拉胶的β-1,4糖苷键[2]。通过酶解制备的卡拉胶寡糖可以表现出比多糖更加多样的生物活性,如抑菌、增强机体免疫功能、抗肿瘤、抗病毒及抗氧化等[3-5]。从Pedobacter hainanensis 13-Q发酵液中分离纯化得到了新型κ-卡拉胶酶(图1),并将其用于κ-卡拉胶的降解,最后结合色谱技术(TLC和HPLC)和质谱技术(ESI-MS和CID-MS~n)对酶解产物进行了分析(图2)。结果表明,该κ-卡拉胶酶作用于κ-卡拉胶的β-1,4糖苷键,酶解产生了一系列低聚合度的κ-卡拉胶寡糖(二糖,四糖,六糖及八糖等),其中κ-卡拉胶四糖最多。降解所得到的寡糖还原端为G4S,非还原端为An。这种新型κ-卡拉胶酶为首次从土地杆菌中分离纯化得到,扩大了产酶菌株的来源。该κ-卡拉胶酶可用于卡拉胶的结构分析和构效关系研究,为卡拉胶的进一步开发与利用提供了有效的技术手段。更多还原