日本鳗鲡肝脏表达抗菌肽2的克隆与表达

【作者】 段明珠； 黄文树； 黄贝；

【机构】 集美大学水产学院；

【摘要】 肝脏表达抗菌肽2(liver-expressed antimicrobial peptide,LEAP-2)是一种新型抗菌肽。本文通过RACE-PCR从日本鳗鲡(Anguilla japonica)的肝脏中扩增得到AjLEAP-2基因的cDNA全长452 bp,开放阅读框预测编码89个氨基酸残基,包括信号肽26个残基,成熟肽41个残基,位于成熟肽的羧基端有高度保守的4个半胱氨酸残基,其基序为-C-X5-C-X4-C-X4-C-。基因组包含有三个外显子,两个内含子,与其他脊椎动物LEAP-2的基因组结构相同。检测了AiLEAP-2基因在肝脏、肠、心脏、血液、皮肤、胃、头肾、后肾、鳔、脾脏、鳃,性腺等组织表达,其中在肝脏中表达量最高;在肠,心脏,血液,皮肤,胃,头肾,后肾等组织中较低且均匀分布,在鳔,脾脏和鳃中表达量极地,性腺中没有检测到表达。脂多糖(LPS)、polyI:c、爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)刺激后组织表达量发生变化:LPS刺激16小时后在肝脏中AjLEAP-2表达量下调,而在肠和,血液中分表在刺激72小时后16小时后表达量上调;polyI:c刺激8小时后肠中表达上调;爱德华氏菌刺激后,在肝脏,肠中8小时表达量开始上调,血液中16小时后表达均上调。结果表明LEAP-2在病原的入侵后日本鳗鲡先天免疫过程中发挥重要作用,本研究有助于结果进一步理解硬骨鱼类的先天免疫过程中的分子机制。更多还原