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mfc酿酒酵母基因工程菌构建及纤维素酶系特性
【机构】 合肥工业大学生物与食品工程学院；
【摘要】 为提高酿酒酵母表达分泌纤维素酶,将携带有多功能纤维素酶基因（mfc）以及食用菌gpd启动子的真核表达载体通过原生质体法遗传转化酿酒酵母,通过PCR筛选,透明圈检测方法筛选出高效表达纤维素酶的酿酒酵母重组菌9个。转化子No.14的总纤维素酶活、内切-β-D-葡聚糖酶、外切-β-D-葡聚糖酶和木聚糖酶活分别是野生菌相应酶活的27倍、63倍、24倍和19倍;总纤维素酶酶学特征研究表明,最适温度50℃,最适酸碱度pH5,20℃-50℃体系中总纤维素酶活稳定,pH5.0酶活最稳定,酶学动力学研究表明总纤维素酶的最大反应速度Vm值为0.001g/（min·L）,Km值为0.469g/L;Cu2+、Fe2+严重抑制总纤维素酶活性,Fe3+的激活效果最显著,当浓度为25mmol/L时,总纤维素酶活是对照的2.4倍。高表达mfc酿酒酵母工程菌的构建为原位糖化发酵木质纤维素产生物乙醇提供优良工程菌株。
- 【会议录名称】 2015中国酶工程与糖生物工程学术研讨会论文摘要集
- 【会议名称】2015中国酶工程与糖生物工程学术研讨会
- 【会议时间】2015-08-21
- 【会议地点】中国江苏镇江
- 【分类号】Q93
- 【主办单位】中国微生物学会酶工程专业委员会（Enzyme Engineering Committee of Chinese Society for Microbiology）、中国生物工程学会糖生物工程专业委员会、镇江东方生物工程有限公司