离子注入木聚糖酶产生菌诱变选育

【作者】 李市场； 姚建铭； 潘仁瑞； 余增亮；

【机构】 中国科学院等离子体物理研究所离子束生物工程学重点实验室；

【摘要】 本文利用离子注入技术对木聚糖酶产生菌黑曲霉进行诱变选育。在诱变选育过程中,注入离子选择诱变育种常用的N⁺,其注入离子能量、剂量与存活率的关系见表1。就现代育种理论认为:被诱变的微生物致死率在75%左右即存活率在25%左右时产量性状的正突变率较高,当在更高的致死率下,虽然突变率可能较高,但是负突变往往很高,而正突变却很低。因此,根据表1.我们选择10keV1.56×10¹⁵个N⁺/cm²作为木聚糖酶产生菌的离子注入参数,实验证实该注入参数在诱变过程中较为有效。经过多次的诱变筛选得到一株高产菌N212。用诱变选育得到的菌株进行正交实验。通过正交实验的结果可知,优化后的发酵培养基为:8%玉米芯,1.5%麸皮,0.1%吐温80,0.5%（NH₄）₂SO₄+0.5%NaNO₃,其他无机盐的成分与Mandels营养盐液中的成分一样,PH5.4。用上述优化的培养基,做诱变菌株N212的产酶生长曲线其结果见图1。由图中可以看出在黑曲霉产酶发酵时间为3天时,木聚糖酶的酶活达到了一个平台期,因此确定该诱变菌株N212的最适发酵时间为3天,它的酶活高达6001U/ml。更多还原