槲皮素对非酒精性脂肪肝细胞模型的改善作用及其机制的探讨

【作者】 李秀丽； 王蓉； 郭云娣； 白玉勤； 郝丹丹； 刘志杰； 王晓晖； 刘青妍； 姜娜；

【机构】 赤峰市红山区迎宾路1号赤峰学院医学院药理学实验室；

【摘要】 目的:探讨槲皮素（quercetin,Que）对非酒精性脂肪性肝（non-alcoholic fatty liver,NAFL）细胞模型的改善作用及其分子机制。方法:用含有10%新生小牛血清的低糖DMEM培养液培养HepG₂细胞,用5mM油酸钠溶液和5000nM长效胰岛素配成脂质堆积诱导液诱导形成NAFL细胞模型。培养细胞分为空白对照组、模型组、阳性药小檗碱(10^-5M)、槲皮素高(10^-4M)、中(10^-5M)、低(10^-6M)组。正常对照组细胞仅用培养液培养;模型对照组在吸弃旧培养液后,换上脂质堆积诱导液诱导;阳性药及给药组分别换上脂质堆积诱导液,同时给予阳性药小檗碱(10^-5M)、槲皮素高(10^-4M)、中(10^-5M)、低(10^-6M)剂量;上述各组细胞继续培养48小时,进行油红染色,并在光镜下观察脂质堆积细胞病理变化;测定各组细胞吸光度的变化,计算抑制率。采用RT-PCR和Werstern-blot的方法研究槲皮素对脂代谢通路和胰岛素信号转导通路相关基因和蛋白表达的影响。结果:槲皮素高、中剂量与模型组比较具有显著性差异（P<0.001）,低剂量组与模型组比较不具有显著差异（P>0.05）,槲皮素高、中剂量对脂质细胞的抑制率与阳性药相当,分别为60.7%、58.3%、55.2%,可呈剂量依赖性减少肝细胞中堆积的TG（P<0.05）含量,肝细胞中TG的变化与油红O染色实验的结果一致。相关机制研究结果显示,在NAFL脂质堆积和具有胰岛素抵抗的HepG2细胞模型中,槲皮素能抑制脂肪酸合酶（FAS）和核转录因子固醇调节结合蛋白Ic（SREBP-1c）的上调,增加肝脏胰岛素信号转导上游关键蛋白IRβ、IRS1的表达。结论:槲皮素对NAFL细胞模型具有改善作用,呈剂量依赖性降低NAFL细胞模型TG水平,其调节脂质代谢紊乱机制可能与抑制肝细胞脂肪酸的从头合成相关靶点基因SREBP-1c和FAS的表达有关;调节胰岛素信号转导通路,改善胰岛素敏感性与增加IRβ、IRS1的表达有关。上述结果表明,槲皮素有可能成为治疗NAFLD有效药物。更多还原