类风湿关节炎中iNKT细胞的调控机制研究

【作者】 张雪娇； 刘嘉琳； 陈冬志； 孟明；

【机构】 河北大学；

【摘要】 研究背景:iNKT细胞同时表达TCR和NK1.1,是连接固有和适应免疫的桥梁。近期发现iNKT细胞参与调控类风湿性关节炎,但机制未明。目的:观察RA患者和模型小鼠的i NKT细胞频率、功能及信号通路变化,探讨i NKT对RA调控作用的机制。方法 :1)收集RA患者外周血分离PBMC,FACS检测i NKT频率;α-Galcer+IL-2体外培养PBMC后动态检测i NKT增殖率、血清和PBMC培养上清中IFN-γ、IL-4;RT-PCR测i NKT中IFN-γm RNA与IL-4m RNA,分析i NKT与IFN-γ/IL-4比值的相关性。2)h G6PI多肽诱导DBA/1小鼠RA模型,FACS检测其外周血、脾脏、肝脏中i NKT频率;Th1/Th2/Th17 kit检测血清细胞因子。3)RA小鼠肝细胞悬液,MACS分选i NKT细胞,Western-Blot检测T-Bet、GATA3水平。结果 :1)活动期RA患者外周血i NKT频率及体外增殖率均显著降低且增殖延迟;血清和PBMC培养上清中IFN-γ/IL-4比值增高,i NKT的IFN-γm RNA高表达、IL-4 m RNA低表达;缓解期i NKT频率、体外增殖率均显著升高,IFN-γ/IL-4比值下降,与活动期比较差异显著;RA患者i NKT频率与IFN-γ/IL-4比值呈负相关。2)RA小鼠外周血、脾脏、肝脏中i NKT频率低于正常鼠;血清中IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ水平升高,IL-4、IL-10降低,其中,i NKT频率与TNF-α、IL-6水平呈负相关。3)RA小鼠i NKT的T-Bet蛋白表达明显增高,GATA-3无显著差异。结论 :RA的免疫失衡和过度炎症反应可能与i NKT细胞频率降低和功能异常有关;而i NKT经T-Bet通路向Th1方向分化促进炎性因子的表达。提示调控i NKT的分化方向有可能成为治疗RA的新手段。更多还原