靶向双抗原至B细胞增强抗肿瘤免疫应答的机制研究

【作者】 马运峰； 刘敏； 罗凤玲； 严俊； 季延红； 徐纪茹；

【机构】 西安交通大学医学部基础医学院病原生物学与免疫学系； 武汉大学医学部基础医学院免疫系； University of Louisville School of Medicine Louisville；

【摘要】 目的 :B细胞不但具有抗体产生功能,也是潜在的抗原递呈细胞。我们前期研究发现通过CD19分子单链抗体(single chain variable fragment:sc Fv)将单个肿瘤抗原靶向至B细胞,能增强宿主的体液免疫和细胞免疫应答,但如何维持长久有效的抗肿瘤免疫应答则需进一步深入研究。CD137表达于活化的T细胞,其活化型抗体能够延长效应性T细胞寿命,在维持有效的T细胞免疫应答中扮演重要角色,通过CD19分子单链抗体将抗原CD137和OVA同时靶向至B细胞,通过测定机体的体液免疫和细胞免疫应答,探索将双抗原靶向至B细胞的可行性,为将肿瘤相关抗原和CD137分子同时靶向至B细胞奠定基础。方法 :克隆CD19分子单链抗体并与CD137分子和鸡卵白蛋白(ovalbumin:OVA)融合,得到融合蛋白sc Fv-CD137-OVA。流式细胞仪检测融合蛋白结合至B细胞的特异性。酶联免疫法检测融合蛋白免疫小鼠后血清中产生的抗体。细胞过继转移实验(纯化供体OT-1小鼠的CD8+T细胞,过继转移至受体SJL小鼠体内,然后用融合蛋白sc Fv-CD137-OVA免疫SJL小鼠)检测受体小鼠体内OT-1 CD8+T细胞的寿命。结果 :体内外实验证实:融合蛋白sc Fv-CD137-OVA能特异性结合至B细胞。免疫小鼠后,体内产生针对CD137和OVA的抗体。细胞过继转移实验证实融合蛋白免疫小鼠后明显延长了SJL小鼠体内OT-1 CD8+T细胞的寿命。结论 :通过CD19分子单链抗体将抗原CD137和OVA同时靶向至B细胞,既产生了体液免疫应答同时通过产生的CD137抗体延长了效应性T细胞寿命,增强了细胞免疫应答。此项研究为将肿瘤相关抗原和CD137分子同时靶向至B细胞奠定了基础,为肿瘤的免疫治疗提供一种新思路。更多还原