表皮生长因子对食管鳞癌细胞Eca109细胞周期及其调控因子的影响

【作者】 胡为民； 李倩倩； 朱红； 王朝莉； 黎仕娟；

【机构】 川北医学院微生物学与免疫学教研室； 川北医学院免疫学与分子生物学研究所；

【摘要】 目的 :目前国内外关于表皮生长因子(EGF)及其受体EGFR对食管癌细胞增殖的影响存有分歧。本研究采用表达EGFR的食管鳞癌细胞系Eca109,经EGF作用后检测细胞周期和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子(CKI)家族成员p21CIP1/WAF1(p21)、p27KIP1(p27)的变化,为进一步探讨EGF及其受体与食管鳞癌发生、发展的关系提供了新的思路。方法 :20ng/ml重组人EGF(rh EGF)作用于血清饥饿的Eca109细胞24小时,采用流式细胞术检测EGF对Eca109细胞周期的影响,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(q RT-PCR)检测p21CIP1/WAF1(p21)、p27KIP1(p27)m RNA的表达情况,Western blot检测p21、p27蛋白的表达情况。结果 :流式细胞仪检测细胞周期,结果显示,EGF组和对照组G1期细胞所占比例分别为(54.90±0.82)%和(65.94±0.74)%(P<0.01),增殖指数PI(%)分别为(45.10±0.82)%和(34.05±0.74)%(P<0.01);q RTPCR结果显示EGF组中p21 m RNA相对表达量为4.33±0.17,明显高于对照组的0.97±0.04(P<0.01),而EGF组中p27 m RNA相对表达量为0.43±0.05,明显低于对照组的1.03±0.03(P<0.01);Western blot结果显示,EGF组中p21蛋白相对表达量为1.02±0.02,明显高于对照组的0.43±0.04(P<0.01),而EGF组中p27蛋白相对表达量为0.25±0.02,明显低于对照组的1.04±0.02(P<0.01)。结论 :EGF有利于Eca109细胞从G1期过渡到S期,促进细胞增殖,可能与调节p21、p27的m RNA和蛋白的表达相关。更多还原