金黄色葡萄球菌TRAP蛋白的CD4+T cell表位的筛选

【作者】 姚笛； 崔玉东； 于思淼； 魏玉华； 刘伟； 于立权； 马金柱； 宋佰芬； 孙虎男；

【机构】 黑龙江八一农垦大学；

【摘要】 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)是一种常见的革兰氏阳性病原菌,可引起人和动物的化脓感染、肺炎、败血症、关节炎以及心内膜炎等,由于抗生素的滥用导致了多种耐药菌株的出现,耐药S.aureus引发的感染是临床面临的棘手难题。因此,利用疫苗防治S.aureus的感染成为一种理想途径。有效筛选优势抗原是制作疫苗的前提,且抗原中起关键作用的是抗原表位,其中CD4+T细胞表位对于表位疫苗的免疫保护效应至关重要。TRAP(target of RNAIII activating protein)在葡萄球菌属中高度保守且具有良好的免疫保护作用,能够引起特异性CD4+T细胞免疫应答,为了寻求免疫保护作用更强的抗原表位,本研究利用生物信息学方法预测TRAP的CD4+T细胞表位,结合TRAP的蛋白质二级结构和同源性分析结果,合成了五个20-mer的候选抗原表位肽段,分别对TRAP蛋白免疫小鼠(BALB/c和C57BL/6)的脾脏CD4+T细胞进行体外刺激,检测CD4+T细胞的增值情况和细胞因子分泌水平,然后利用初步筛选的优势表位肽段免疫小鼠,检测其细胞免疫应答情况。结果表明包含20-39和94-113位氨基酸的肽段产生了较强的TRAP抗原特异性的CD4+T细胞增值,同时分泌了高水平的IFN-γ和IL-17,细胞因子IL-10和IL-4的分泌水平一般,暗示筛选的两个TRAP优势表位可能属于Th1型,且分泌的高水平IL-17可能有助于中性粒细胞对S.aureus的清除作用。TRAP CD4+T细胞表位的筛选为设计有效的预防S.aureus感染的表位疫苗奠定一定基础。更多还原