过表达Aire的DC细胞诱导外周CD4+T细胞耐受的研究

【作者】 李冬贝； 李海军； 牛坤伟； 郭彦彤； 郭川； 李一； 杨巍；

【机构】 吉林大学基础医学院免疫学系；

【摘要】 目的 :在外周免疫系统,自身免疫调节因子Aire可表达在血源性树突状细胞(DCs)中,DC可通过诱导自身反应性CD4+T细胞克隆无能或克隆清除来维持T细胞耐受,而Aire是否参与这一过程尚不清楚,因此我们研究过表达Aire的DC对CD4+T细胞耐受功能的影响。方法 :1、RT-q PCR、流式检测Aire对DC中耐受相关分子的影响;2、RT-q PCR、Annxin-V和7-ADD染色检测过表达Aire的DC(Aire-DC)对T细胞耐受性分子及CD4+T细胞凋亡的影响;3、流式检测Aire-DC对CD4+T细胞TCR信号通路的影响;4、流式检测Aire-DC诱导的CD4+T细胞对小鼠T1D发生的影响。结果 :1、Aire上调DC中1型糖尿病(T1D)相关自身抗原GAD65/67、Ins2、IA-2和IGRP的表达;Aire下调经LPS刺激的DC的表面分子CD40、CD80、CD83、CD86、CD11c的表达。2、Aire-DC上调STZ-T1D鼠T细胞耐受性分子CD73、Lag3、FR4的表达和WT鼠中Lag3、FR4的表达;Aire-DC促进STZ-T1D鼠脾细胞中CD4+T细胞的凋亡。3、Aire-DC下调经Insulin刺激的两种鼠来源脾细胞中CD4+IFN-γ+T细胞数量及CD4+T细胞中TCR信号通路分子Ca2+和p-ERK的表达。4、将与Aire-DC混合培养的WT小鼠脾细胞,经尾静脉回输小鼠,然后腹腔注射STZ诱导T1D,发现小鼠血糖浓度明显降低,且小鼠脾细胞的CD4+T细胞中IFN-γ、Ca2+和p-ERK的表达减少。结论 :表达Aire的DC通过诱导自身反应性T细胞凋亡,同时抑制TCR信号通路,使其功能性失活,诱导自身反应性T细胞耐受,从而预防T1D的发生。更多还原