四种不同T细胞表位肽构建的IL-13新型多肽哮喘疫苗的研究

【作者】 黄艳； 何谷； 杨莉；

【机构】 四川大学生物治疗国家重点实验室；

【摘要】 研究背景:过敏性哮喘是一种可逆的慢性气道炎症疾病,哮喘患者存在严重的气道高反应和肺部细胞粘液的过度分泌,同时会增加血清中IgE抗体、活化肥大细胞并且引起连锁的肺部嗜酸性粒细胞的活化以及一系列其他哮喘相关反应特征。白细胞介素-13(Interleukin-13,IL-13)及相应受体在过敏性哮喘中起着重要的作用。抑制IL-13的作用是哮喘免疫治疗的一个发展方向。目的:本研究选用IL-13短肽偶联四种不同辅助T细胞表位肽(P1-P4),联合氢氧化铝佐剂制备新型治疗哮喘多肽疫苗,研究四种多肽疫苗对小鼠OVA诱导的哮喘模型的治疗效果,用以筛选出针对IL-13的治疗性哮喘疫苗。方法:运用化学方法合成与四种不同来源的辅助T细胞表位肽偶联的IL-13多肽疫苗(P1-IL13 P4-IL13),通过免疫后小鼠血清抗IL-13抗体滴度的高低和初步药效结果评估最优候选疫苗。四种候选疫苗分别皮下免疫Balb/c小鼠,完成6次免疫后OVA造模。OVA雾化3天后处死小鼠,收集肺泡灌洗液(BALF)、血清和重要脏器。BALF离心上清液用于检测IL-13、IL-4、IFN-γ和总IgE的产生情况,重悬沉淀进行相关细胞计数。小鼠血清用于检测抗OVA-IgE抗体。对小鼠肺组织进行PAS和MASSON三染进行病理学评估。结果:随着免疫次数的增加,小鼠中抗IL-13抗体滴度持续增高,其中P1一IL13组和P4-IL13组明显优于P2-IL13组和P3-IL13组。与建模组(NS组)对比,各免疫组的BALF上清细胞因子IL-13、IL-4、IFN-γ和总IgE存在降低趋势,P4-IL13组明显优于其他3组。与NS组相比,四个免疫组的小鼠血清中抗OVA特异的IgE抗体滴度和BALF液中总IgE抗体滴度呈现下降趋势,P4-IL 13组明显优于其他3组。在肺部组织病理切片染色中,PAS染色和MASSON三色染色也表明P4-IL13组能较好的降低小鼠气道炎症反应并抑制杯状细胞的增殖和胶原的沉积。结论:四种新型疫苗对小鼠预防性哮喘模型有不同程度的保护效果。其中,P4-IL13多肽疫苗能较好诱导小鼠针对IL-13多肽的免疫反应,并有效保护小鼠哮喘症状的发生。更多还原