SSeCKS通过HSPA12B调节NF-κB信号转导对星形胶质细胞炎症激活的影响

【作者】 陶涛； 沈爱国； 程纯；

【机构】 江苏省炎症与分子药靶重点实验室,南通大学医学院免疫学系；

【摘要】 研究背景:星形胶质细胞是脑内最主要的胶质细胞,近年来研究发现其在中枢神经系统(CNS)疾病发生中是主要的炎症细胞,可通过调节小胶质细胞及免疫细胞的激活,发挥重要作用。本课题组及其他课题组在前期的研究也发现,NF-κB信号转导的激活在星形胶质细胞的激活中发挥重要作用,并发现Src抑制的蛋白激酶C底物(SSeCKS)可通过促进NF-κB的激活促进星形胶质细胞炎症激活及其调节的神经元损伤。研究目的:本文从蛋白分子网络调节的角度出发,寻找SSeCKS调节星形胶质细胞NF-κB信号转导分子,在此基础上分析上述的调节在星形胶质细胞激活及CNS炎症反应中的作用。研究方法:首先运用免疫共沉淀联合质谱分析的方法寻找发现SSeCKS的相互结合蛋白:并运用GSTpulldown、免疫共沉淀、免疫荧光的方法确定上述蛋白质能体内外结合形成复合物。在此基础上,分析上述复合物形成对NF-κB信号转导激活的调节作用及其星形胶质细胞激活的影响:最后在CNS炎症模型中,分析干预上述复合物形成对神经系统功能的影响。研究结果:首先利用SSeCKS在星形胶质细胞等进行免疫共沉淀,并对其进行质谱分析,发现HSPA12B可与SSeCKS结合;在此基础上,分别在体外及体内验证了SSeCKS可与HSPA12B结合形成复合物。还发现SSeCKS与HSP12B结合后可抑制NF-κB的信号转导。深入的研究发现HSPA12B可通过与IKBα及NF-κBp50结合,通过抑制IKBα的磷酸化及其调节的泛素化降解,从而抑制IKBα与NF-κBp50的解离,阻碍NF-κBp65的细胞核转运,抑制NF-κB的激活。当SSeCKS与HSPA12B结合形成复合物后,可抑制HSPA12B的蛋白稳定性,延缓其对NF-κB信号转导的抑制作用,促进NF-κB激活。在星形胶质细胞中,SSeCKS-HSPA12B复合物可通过激活NF-κB信号转导,促进星形胶质细胞的炎症激活,表现为细胞因子分泌增加、细胞增殖加速、细胞的形态变化,从而促进炎症反应。进一步在实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)动物模型中发现干预星形胶质细胞内SSeCKS-HSPA12B复合物可抑制小胶质细胞及T细胞的激活,从而抑制炎症反应,延缓EAE的病程。研究结论:CNS炎症反应中,星形胶质细胞内SSeCKS可与HSPA12B形成复合物,通过抑制NF-κB信号转导激活抑制星形胶质细胞的激活,从而抑制CNS炎症反应及神经功能缺失。更多还原