Tax促进成人T细胞白血病细胞系C8166的存活分子机制

【作者】 朱小飞； 郭晓芳； 马淑君； 杨波； 高志涛； 张婧婧； 王辉；

【机构】 新乡医学院医学检验学院临床免疫检验教研室； 新乡医学院免疫研究中心；

【摘要】 研究背景:成人T细胞白血病(ATL)是由人T-淋巴病毒1(HTL-1)引起的恶性淋巴细胞增生性疾病。病毒调节蛋白Tax是早期诱导宿主细胞自发性克隆增殖或抵抗凋亡的重要调控因子。Tax能直接通过NF-κB信号通路调控相关基因表达。Sirt1是细胞存活的关键蛋白之一,而在感染的T细胞,细胞存活蛋白Sirt1水平呈现高表达。目的:研究病毒蛋白Tax是否能够通过调控Sirt1转录活性,促进成人T细胞白血病细胞系C8166存活。方法:采用生物信息学分析Sirt1启动序列、构建荧光素酶报告基因,通过细胞转染分析,Tax对Sirt1转录活性影响;通过RNAi技术和流式细胞法,检测Sirt1表达水平对MT2细胞系增殖的影响。结果:Sirt1转录起始点-2000bp启动序列存在3个IkB位点,构建含1、2、3个IkB位点的-642bp、-1000、-1205b启动系列片段的荧光素酶报告基因质粒pLuc-sirt1-1、pLuc-sirt1-2、pLuc-sirt1-3,分别与pCMV-Tax共转染293T细胞,荧光素酶活性分别是对照的4.5、8.5和12.5倍;Sirt1 RNAi处理后,C8166细胞对Fas介导的凋亡信号敏感性显著增加,凋亡率增加21%。结论:Tax通过增加Sirt1转录活性,增加Sirt1表达水平,进而增强C8166细胞的抗凋亡能力。更多还原