microRNA-155在4T1细胞株中通过诱导休眠拮抗阿霉素的化疗作用

【作者】 张征峥； 张月静； 吴京乔； 魏林； 宋淑霞；

【机构】 河北医科大学免疫教研室；

【摘要】 目的:探讨microRNA-155在化疗药物阿霉素诱导的三阴性乳腺癌细胞株4T1凋亡中的作用。方法:用三阴性乳腺癌细胞株4T1进行传代培养,阿霉素以适当浓度作用于4T1细胞,实时定量PCR检测miR-155的表达。利用已建立的高表达miR-155的4T1细胞模型及相应对照,分别在加入阿霉素的0、24、48、72h,MTS检测阿霉素对细胞的抑制作用,通过测定caspase 3/9活性及TUNEL实验探讨miR-155对细胞凋亡的影响。利用流式细胞术检测阿霉素作用后对细胞周期的影响。结果:(1)阿霉素以适当浓度作用于4T1细胞,实时定量PCR检测显示,miR-155表达增加。(2)MTS增殖实验显示,对照组经阿霉素处理后,增殖速度明显减慢,而4T1-miR155组经阿霉素处理后,在第0h、24h、48h,其增殖速度与未处理组差别无显著性意义,而在第72h,增殖速度明显低于未经阿霉素处理的4T1-miR155组。(3)Caspase 3/9活性检测结果显示,与未经阿霉素处理的对照组相比,对照组经阿霉素处理后,caspase 3活性明显增强(P<0.05),caspase 9活性无改变。4T1-miR155组经阿霉素处理前后,Caspase 3/9活性无改变(P>0.05)。(4)TUNEL检测结果显示,经阿霉素处理后,对照组大量细胞出现凋亡,而4T1-miR155组细胞凋亡细胞明显少于4T1-NC。(5)经阿霉素处理后,4T1-miR155组细胞G0/G1期细胞比例明显多于对照组。结论:miR-155通过诱导4T1肿瘤细胞休眠,拮抗阿霉素的化疗效果。更多还原