食管鳞癌中miR-203b的表达及其甲基化状态的研究

【作者】 梁佳； 董稚明； 郭艳丽； 沈素朋； 郭炜；

【机构】 河北医科大学第四医院河北省肿瘤研究所病理研究室；

【摘要】 目的:检测miR-203b基因在食管鳞状细胞癌(Esophageal squamous cell carcmoma,ESCC)中的表达及其甲基化状态,探讨miR-203b基因在食管鳞癌发生发展中的作用。方法:分别应用实时定量RT-PCR(Real-time RT-PCR,qRT-PCR)以及甲基化特异性PCR(Methylation specific PCR,MSP)的方法检测DNA甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycitydine,5-aza-dC)处理前后的食管癌细胞系(TE1、TE13、YES-2、EC109、T.TN)以及食管鳞癌组织及相应癌旁正常组织中miR-203b基因的表达和甲基化状态。结果:未经5-aza-dC处理的五种食管癌细胞系中miR-203b基因的表达均相对较低,经5-aza-dC处理后,五种食管癌细胞系中miR-203b基因的表达均增高。五种食管癌细胞系在5-aza-dC处理前表现为miR-203b基因高甲基化状态,应用5-aza-dC处理后,YES-2和T.TN细胞系中miR-203b基因甲基化程度降低,非甲基化程度增加,其余三种细胞系中miR-203b基因均表现为非甲基化状态。miR-203b基因在食管鳞癌组织中的表达显著低于癌旁正常组织(P<0.05),并与组织学分化程度密切相关(P<0.05)。食管鳞癌组织中miR-203b基因的启动子区甲基化率为(57.8%,48/83),显著高于癌旁正常组织(12.0%,10/83)(P<0.05),并与组织学分化程度密切相关(P<0.05)。发生miR-203b基因甲基化的食管鳞癌组织中miR-203b基因的表达显著低于未发生甲基化的食管鳞癌组织(P<0.05)。结论:miR-203b基因在食管鳞癌中的异常低表达与食管鳞癌的发生、发展密切相关,且其启动子区甲基化可能是导致其表达沉默的机制之一。更多还原