CD40 siRNA对MRL/Lpr狼疮小鼠炎症反应的影响

【作者】 庞春艳； 王永福；

【机构】 包头医学院第一附属医院风湿免疫科；

【摘要】 背景:系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种多发于青年女性,并可累积多系统、多器官的自身免疫性疾病。Th1细胞、Th17细胞及其分泌的IFN-γ、IL-17等多种细胞因子和自身抗体在SLE的病理过程中起重要作用,其中抗核抗体(ANA)和抗双链DNA(anti-dsDNA)抗体在SLE诊断和指导治疗方面具有重要的意义。小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)是一种特定基因沉默技术,本研究采用siRNA技术沉默MRL/Lpr狼疮小鼠中CD40基因的表达,探讨CD40基因特异性siRNA对狼疮小鼠的治疗作用。目的:观察CD40的小干扰RNA(siRNA)对系统性红斑狼疮(SLE)动物模型MRL/Lpr小鼠细胞因子IFN-γ、IL-17和dsDNA表达水平的影响,探讨CD40 siRNA治疗MRL/Lpr小鼠的可能性。方法:16只MRL/Lpr小鼠随机分为对照组、空载体组、CD40-siRNA1组及CD40-siRNA2组,每组4只,将成功构建的CD40 siRNA表达载体尾静脉注射MRL/Lpr小鼠,对照组和空载体组小鼠分别注射等剂量、等比例的磷酸盐缓冲液(PBS)和pGFP-V-RS空载体。每隔1天1次,共6次。注射后2、5、8、11和14 d小鼠尾部采血,ELISA法检测4组小鼠血清中IFN-γ、IL-17和dsDNA的表达水平变化;RT-PCR法检测小鼠脾脏组织中CD40mRNA的表达水平。结果:注射后2、5和8 d CD40-siRNA1组和CD40-siRNA2组MRL/Lpr小鼠血清中IFN-γ和IL-17的浓度明显下降,较对照组和空载体组比较差异有统计学意义(P<0.05),注射后11和14d4组小鼠比较差异无统计学意义。注射后2、5和8 d CD40-siRNA1组和CD40-siRNA2组MRL/Lpr小鼠血清中anti-dsDNA抗体水平降低,较对照组和空载体组比较差异有统计学意义(P<0.05),注射后11和14 d 4组小鼠比较差异无统计学意义。注射后14d CD40-siRNA1组和CD40-siRNA2组MRL/Lprd小鼠脾脏组织中CD40mRNA的表达水平明显低于对照组和空载体组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MRL/Lpr小鼠注射CD40 siRNA载体后,血清中IFN-γ和IL-17水平降低,anti-dsDNA抗体水平降低,CD40 mRNA表达水平下降,说明CD40 siRNA可以减轻MRL/Lpr小鼠炎症反应,减轻其疾病活动度,提示其对SLE动物模型MRL/Lpr小鼠有治疗作用。更多还原