昆虫ALP蛋白的免疫识别作用研究

【作者】 文代华； 曹娜静； 张景海； 张嵘；

【机构】 沈阳药科大学；

【摘要】 昆虫应对病原微生物入侵时的先天性免疫应答主要经由模式识别、信号转导与调制、产生效应分子三个主要步骤而实现。模式识别通过病原体相关分子模式(Pathogen associated molecular pattern,PAMP)以及模式识别受体(Pattern recognition receptor,PRR)二者的相互作用产生,是机体启动免疫应答的首要因素。已报道的PRRs如PGRP、GNBP、CTL等,一般识别与之对应的某一种特定PAMP。ALP蛋白在不同物种中具有高度相似的空间结构,有报道指出,ALP蛋白具有免疫学功能。本文以家蚕(Bombyx mori)与柞蚕(Antheraea pemyi)为研究对象,对ALP蛋白的模式识别受体功能以及ALP蛋白下游的信号转导通路及调控机制进行研究。采用柱层析技术及分子生物学方法获得天然及重组ALP蛋白并制备多克隆抗体,考察ALP蛋白与不同PAMP的结合能力,以及对酚氧化酶原(pro-phenoloxidase,pPO)系统的激活能力。Western blot结果显示,ALP蛋白能够特异性地与不溶性β-1,3 glucan,DAP-PGN和Lys-PGN结合;进一步的ELISA结果显示,ALP蛋白亦能够结合可溶性的LPS,LTA,β-1,3 glucan,DAP-PGN,Lys-PGN和Mannose。PO活力测定显示ALP蛋白与上述6种PAMPs结合后,均使PO活力上调。综上,昆虫ALP蛋白具有广谱的模式识别受体特性,并参与激活pPO系统。更多还原