转cry1Ia8基因甘蓝花粉对意大利蜜蜂生长影响的初步研究

【作者】 杨卫杰； 仪登霞； 杨丽梅； 方智远； 孙培田； 刘玉梅； 庄木； 张扬勇；

【机构】 中国农业科学院蔬菜花卉研究所；

【摘要】 crylIa8是一种新型的Bt杀虫蛋白基因,其编码的毒蛋白对小菜蛾等鳞翅目害虫具有高毒力,且Cry1Ia8与生产上常用的Cry1Ac杀虫晶体蛋白之间没有交互抗性。蜜蜂是田间传粉的主要昆虫,而蜜蜂体内消化类酶和解毒类酶是影响蜜蜂生长的重要指标,转基因植物对蜜蜂存活和发育的影响是转基因生态风险评估的重要组成部分,因此进行转cry1Ia8基因甘蓝花粉对蜜蜂的安全性研究很有必要。以转crylIa8基因甘蓝花粉为材料,研究其对意大利蜜蜂存活率、体质量以及体内酶活性的影响。在盛花期采集转基因甘蓝和对照甘蓝花粉,为防止花粉活力下降,迅速用80目筛过滤后放入50 mL离心管,密封后置于-20℃冰箱中备用。用转基因甘蓝花粉和对照花粉饲喂意大利蜜蜂幼虫,然后分别对4、5、6日龄的蜜蜂进行称质量,且对6日龄工蜂幼虫体内中肠蛋白酶和解毒酶类进行活力测定,并在饲喂20 d后调查未成熟蜜蜂存活率。数据利用SAS9.2软件进行统计分析。试验结果显示,取食转基因甘蓝花粉与对照相比,4、5、6日龄的蜜蜂幼虫体质量均没有显著差异,且20 d后未成熟蜜蜂存活率差异不显著。通过测定6日龄蜜蜂体内酶活力发现,饲喂转基因花粉和对照花粉的意大利蜜蜂幼虫体内的解毒酶中谷胱甘肽-S-转移酶和乙酰胆碱酯酶活力没有显著差异,但α-乙酸萘酯酶活力明显高于对照(P<0.01),高效催化了酯类物质的水解,中肠总蛋白酶活力没有显著差异,强碱性类胰蛋白酶、弱碱性类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶活力明显低于对照(P<0.01),说明杀虫蛋白进入蜜蜂体内被活化后,引起某些代谢酶和消化酶活性的变化,但未对蜜蜂的生长产生明显的影响。用纯化的Cry1Ia8蛋白饲喂蜜蜂,其存活率与对照相比也没有显著差异,说明转基因花粉对蜜蜂的生长没有明显的不利影响。这与前人报道的关于转基因安全评价的试验结果相似。上述试验初步证明了转cry1Ia8甘蓝花粉对意大利蜜蜂幼虫的生长没有负面影响,但要确认该转基因甘蓝花粉对蜜蜂是安全的还需要进一步的研究。更多还原