白花前胡甲素在大鼠肝微粒体中的HPLC测定法及酶促动力学

【作者】 胡新颖； 普布赤列； 高学敏； 朱铉；

【机构】 延边大学药学院； 西藏自制区林芝食品药品监督管理局； 厦门大学医学院；

【摘要】 目的:建立一种快速准确的检测大鼠肝微粒体中前胡甲素（Pd-Ia）含量的方法,并研究前胡甲素（Pd-Ia）在大鼠肝微粒体中的药物酶促动力学以及辅助因子NADPH、NADH对其代谢的影响。方法:以华蟾毒精为内标物,采用Hypersil-C₁₈（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,以甲醇-水（75:25）为流动相,流速1 mL·min^-1,检测波长321 nm,柱温25℃,进样量20μL:超速离心法制备大鼠肝微粒体,高效液相色谱法测定孵育液中白花前胡甲素（Pd-Ia）原形药物的浓度。研究白花前胡甲素（Pd-Ia）的酶促动力学,推导出药物半衰期t_1/2（min）,并计算体外酶对药物的清除率(Cl_int)。同时观察不同浓度肝微粒体蛋白对白花前胡甲素（Pd-Ia）代谢的影响。结果:Pd-Ia浓度在1～100μg·mL^-1范围内与峰面积呈现良好的线性关系（r=0.9989）,日内RSD值为2.3%～7.4%;日间RSD值为8.0%～14.5%;萃取回收率为98.38%;Pd-Ia在肝微粒体中呈线性消除,消除速率不随药物底物浓度的增加而增加,t_1/2为（41.74±10.71）min;C_max为（57.22±3.27）μg·mL^-1;Cl_int为（0.0034±0.0199）mL·min^-1·mg^-1。结论:本文建立的方法操作简单,方法灵敏、特异,结果准确;白花前胡甲素在大鼠肝微粒体中呈线性消除,消除速率随微粒体蛋白含量的减小而降低,为NADPH和NADH所共同介导的代谢。更多还原