VEGF/KDR双靶向阻断对膀胱癌细胞及血管生成抑制作用的体内外实验研究

【作者】 陈秀玲； 魏巍； 刘禄成；

【机构】 吉林大学第二医院泌尿外科；

【摘要】 目的:研究VEGF/KDR双靶向治疗在体内外抑制人膀胱癌T24细胞和血管生成的作用以及对荷瘤裸鼠膀胱癌生长的影响。方法:构建针对血管内皮生长因子(VEGF)的VEGFsiRNA和VEGF受体Ⅱ(KDR)的可溶性受体(sKDR)表达质粒共转染细胞系,从细胞和整体动物水平分别动态观察两者联合应用对膀胱癌生长的抑制作用。采用噻唑蓝(MTT)比色法和流式细胞仪(FCM)测定其体外增殖和凋亡情况,筛选并克隆对T24细胞抑制作用最强的细胞株;再通过建立荷瘤裸鼠膀胱癌模型,检测肿瘤细胞VEGF表达强度和肿瘤间质微血管密度(MVD),并对肿瘤组织TOPOⅡα增殖指数和凋亡指数进行分析。结果:MTT和FCM显示,VEGFsiRNA和sKDR单独或联合应用均可在不同程度上抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡,但共转染细胞生存率(P<0.0001vsVEGFsiRNA)而凋亡率最高(P<0.01vsVEGFsiRNAorsKDR);体内实验发现,VEGFsiRNA和sKDR单独或联合应用最为明显,且联合应用组的肿瘤组织MVD最少,肿瘤细胞增殖指数最低,凋亡指数最高,与单独治疗组比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论:VEGFsiRNA通过下调VEGF,sKDR通过与VEGF竞争性结合来有效发挥对膀胱癌生长及血管生成的抑制作用,而靶向双位点较单位点的治疗效果更显著,从而为临床膀胱癌的联合基因治疗提供了依据和新的思路。更多还原