sKDR抑制膀胱癌细胞生长的实验研究

【作者】 刘禄成； 陈秀玲； 魏巍；

【机构】 吉林大学第二医院泌尿外科；

【摘要】 目的:探讨可溶性血管内皮生长因子受体(sKDR)对膀胱移行细胞癌株T24细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法:RT-PCR方法提取KDR胞外血管内皮生长因子(VEGF)结合区编码基因,构建真核分泌型表达质粒pcl-KDR,脂质体法转染至T24细胞,经G418抗性压力筛选稳定转染细胞株。ELISA法检测细胞培养上清VEGF结合活性,筛选稳定表达sKDR的T24细胞株,RT-PCR检测细胞KDR基因表达水平,四甲基偶氮唑盐比色法测定sKDR对T24细胞及人脐带静脉内皮细胞(HUVEC)生长增殖的影响,流式细胞仪观察细胞周期及凋亡情况。结果:稳定表达sKDR的T24细胞KDRmRNA表达水平(0.665±0.048)明显高于空质粒对照组(0.160±0.015)(P<0.0001),细胞增殖水平下降了55.1%(P<0.0001),其细胞培养上清抑制HUVEC增殖的能力提高了41.6%(P<0.0001),出现了明显的G0/G1期阻滞(P=0.0078)和细胞凋亡(凋亡率12.7%)。结论:靶向KDR的sKDR通过干扰VEGF/KDR的信号传导通路可抑制膀胱癌T24细胞及HUVEC在体外的生长速度,KDR有可能成为新的膀胱癌抗血管生长治疗靶点。更多还原