X射线照射后A549肺癌细胞ku80 mRNA及其蛋白表达的变化

【作者】 任振义； 金儿； 卢忠； 祁明浩； 叶健； 潘月龙； 白春学； 金一尊；

【机构】 杭州市第一人民医院呼吸科； 复旦大学附属中山医院； 复旦大学放射医学研究所；

【摘要】 目的探讨不同剂量X射线照射A549细胞后Ku80 mRNA和及其蛋白表达的变化。方法:以免疫荧光化学染色A549肺癌细胞后检测ku80蛋白在细胞核和细胞浆内的分布。利用直线加速器所产生的X射线照射A549细胞4、8、12 Gy后1h、4h、8h提取细胞总RNA,以RT-PCR方法测定ku80 mRNA水平的变化。同样剂量照射后于24、48、72h后提取细胞核蛋白,以Western blot方法检测ku80蛋白水平的变化。结果(1)细胞免疫荧光化学染色显示Ku80蛋白在A549细胞核内高表达,细胞浆内也有少量表达。(2)A549细胞接受4 Gy照射后1h、4h ku80 mRNA表达与对照组相比没有显著差(P>0.05);4 Gy照射后8h以及8 Gy、12 Gy照射后1h、4h、8h ku80 mRNA表达与对照组相比表达增多(P<0.05)。(3)4 Gy照射后24、48h内核内蛋白量与对照组相比没有显著差异(P>0.05),但4 Gy照射后72h以及8、12 Gy照射后24h、48h、72h内与对照组相比表达增多(P<0.05),照射后Ka80蛋白上升可持续72小时。结论A549肺癌细胞存在细胞核内ku80高表达,在射线照射后其mRNA和蛋白水平均可上调,提示ku80与放射损伤修复有密切关系。更多还原