衰老对单核细胞蛋白质组影响的研究

【作者】 沃兴德； 卢德赵； 王亮； 李毅； 唐利华；

【机构】 浙江中医药大学生命科学学院；

【摘要】 衰老是一个复杂的过程,是多种因素相互作用的结果。其中包括遗传因素以及从基因、细胞、器官至整体的组织结构和功能调节变化等因素。目前存在许多有关衰老理论的假说,其中免疫衰老说认为随年龄增长,机体免疫功能与机体衰老呈平行下降,主要由于:老年期胸腺明显萎缩,血中胸腺素浓度下降,使T细胞分化、成熟和功能表达均相应极度降低。T细胞在抗原刺激下转化为致敏淋巴细胞的能力明显减弱,对外来抗原的反应减弱,导致机体对疾病感染的抵抗力减弱。B淋巴细胞对抗原刺激的应答随增龄而下降,抗原和抗体间的亲和力下降;需要T细胞协助的体外免疫应答也随增龄而下降。为了研究免疫衰老的本质,本实验采集4组同一家族(祖父,父亲,儿子或外祖母,母亲,女儿)血样,以消除遗传差异,使用Ficoll离心法分离出人外周血单核细胞(包括单核-吞噬细胞、B淋巴细胞和T淋巴细胞),并利用凝胶内差异显示电泳技术(DIGE)获得不同年龄组单核细胞蛋白质组图谱,并用DeCyder Image QuantTM V 5．0分析软件分析衰老对免疫细胞蛋白质组的影响,结果显示在扫描所得的18张蛋白质组图谱中被检测到的蛋白质点最多有1061个,平均987个,其中所有图谱共有的相匹配点有688个,匹配率为69．8％。不能相匹配的检测点被认为是杂质微粒或者由实验所带来的随机误差点。对其中相匹配的688个点进行统计学分析,有165个蛋白质点的含量差异超过10％,16个蛋白质点的含量差异超过20％。其中青年组中有12个蛋白质点表达量比老年组高20％以上,2个蛋白质点表达量低20％以上,对此14蛋白质点进行质谱鉴定,结果表明:老年组中的热休克蛋白70(Heat shock protein 70),Alpha 烯醇化酶(Alpha enolase),波动蛋白(vimentin),肌球蛋白(MYL6 protein myosin),肌动蛋白 (actin)微管蛋白(Tubulin)和细丝蛋白片段(FLJ00119,Filamin),二磷酸鸟苷分离抑制因子(Rho-GDP- inhibitor 1)以及干扰素调节因子4(Interferon regulatory factor 4,IRF-4)均明显低于青年组,而中年组则未见明显差异。更多还原