鼠胚胎干细胞诱导分化为神经元的研究

【作者】 黄华容； 徐超； 赵小立； 张铭；

【机构】 浙江大学生命科学学院；

【摘要】 胚胎干细胞(Embryonic stem cell,ESC)是从囊胚中内细胞团(Inner mass cells,ICM)或原始生殖细胞(Primordial germ cells,PGCs)分离和克隆的多能性细胞,具有强大的自我更新能力和多向分化潜能,能够在体内或体外分化为成体中任何细胞类型。ES细胞作为体外理想的细胞模型,可以研究真核细胞在早期胚胎发育时期基因的表达和调控;也为未来的再生医学带来了希望。目前,诱导胚胎干细胞分化的方法可以分为拟胚体法、共培养法和单层贴壁直接诱导法三类,ES细胞单层贴壁直接诱导法是一类前景看好的新方法。我们建立了一种单层贴壁直接诱导ES细胞分化为神经元的新方法。将组蛋白脱乙酰酶抑制剂(丁酸钠)应用于神经细胞分化的研究,使得ES定向分化为神经细胞的周期更短,效率更高,操作更简便。利用组蛋白脱乙酰酶抑制剂-NaB打破组蛋白乙酰化的平衡,促使染色质松散,从而抑制胚胎干细胞增殖,使起尽快步入分化状态,随即采用单层贴壁培养分化的方法结合添加神经诱导培养液N2827使其分化成神经细胞。结果表明此方法可获得高比例的神经细胞,在分化第4-6天时以 nestin阳性的神经祖细胞为主,分化两周后就可产生大量表达GFAP的星性胶质细胞及表达β-tubulin Ⅲ的神经元。通过LAPS芯片检测诱导出的神经元具有放出惊厥样电位的功能。更多还原