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甲酸脱氢酶在Klebsiella pneumoniae醛脱氢酶失活菌中的构建与表达
【机构】 三明学院化学与生物工程系； 清华大学化学工程系生物化工研究所；
【摘要】 在甘油厌氧发酵生产1,3-丙二醇的过程中,需要消耗还原当量NADH,NADH的有效供给决定了1,3-PD的产量和得率。本文采用PCR的方法从Candida boidinii基因组中克隆编码fdh的基因,将该基因片段插入载体pMALTM-p2X,构建表达载体pMALTM-p2X-fdh,并转入1,3-PD醛脱氢酶失活菌 Klebsiella pneumoniae DA-1HB,获得重组菌Klebsiella pneumoniae DAF-1。研究了IPTG诱导FDH过量表达的条件。结果表明,fdh基因表达的蛋白分子量为40．2 kD;IPTG诱导表达研究表明,在IPTG 浓度0．5 mmol／L时,诱导3 h后甲酸脱氢酶表达明显;发酵过程中甲酸脱氢酶比酶活达到4．82U／mg; 与出发菌株K．pneumoniae DA-1HB相比,重组菌DAF-1合成1,3-丙二醇的浓度提高了19．2％?
【关键词】 甲酸脱氢酶；
醛脱氢酶；
Klebsiella pneumoniae；
NADH；
1,3-丙二醇；
【基金】 国家重点基础研究发展计划(973计射)资助项目(2003CB716007)~~
- 【会议录名称】 华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流会论文集
- 【会议名称】华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流会
- 【会议时间】2006-10
- 【会议地点】中国浙江杭州
- 【分类号】Q78
- 【主办单位】浙江省生物化学与分子生物学学会、安徽省生物化学与分子生物学学会、福建省生物化学与分子生物学学会、江西省生物化学与分子生物学学会、山东省生物化学与分子生物学学会、上海市生物化学与分子生物学学会、江苏省生物化学与分子生物学学会