骨髓间质干细胞体外诱导分化为神经细胞的实验研究

【作者】 章昀；

【机构】 浙江大学医学院附属第二医院神经内科；

【摘要】 目的了解体外分离培养的大鼠骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)诱导分化成神经细胞的能力,并观察MSCs在体外诱导分化过程中的变化规律。方法用密度梯度离心法分离SD大鼠MSC,体外扩增培养纯化。并对MSCs进行CD29,CD106,CD45,CD34等表面分子标志抗原的鉴定。诱导MSCs分化为神经样细胞。免疫细胞化学鉴定有神经元烯醇化酶(NSE),神经干细胞标志物巢蛋白(nestin)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。结果未经诱导分化的MSCs 只有个别细胞的胞浆呈棕黄色(<2％),即无Nestin、GFAP、NSE的表达。诱导分化后1,MSCs上 Nestin的表达明显增强,表现为部分细胞呈棕黄色甚至深棕色,阳性率为35．18±1．32％,3h时为38．75 ±2．46％,5h时细胞染色变浅,阳性率开始下降。诱导分化6h后大部分细胞表达神经元特异性标志物 NSE,阳性率为77．52±3．65％,24h仍有86．37±1．26％的细胞表达NSE。而星形胶质细胞标志物GFAP 在培养过程中一直呈较低水平表达。表明MSCs在体外可以分化为神经元样和星形胶质样细胞。结论本实验从大鼠骨髓中分离出MSCs并成功地培养和扩增;MSCs经诱导剂诱导后可在体外分化为神经样细胞,推测其步骤和过程是:MSCs首先转化为神经干细胞(neural stem cells,NSCs),再由NSCs 分化为神经样细胞。更多还原