Pin1在恶性血液病细胞中的表达及与细胞周期关系的研究

【作者】 朱园园； 黄河； 孙洁； 蓝建平； 来晓瑜； 李静远； 施继敏； 余建； 谭亚敏； 林茂芳；

【机构】 浙江大学医学院附属第一医院骨髓移植中心；

【摘要】 目的:Pinl(肽酰脯胺酰顺反式异构酶)是一种新近发现的端粒结合蛋白,其在许多肿瘤中被发现是高表达的,但是在恶性血液病中的表达尚不清楚。本研究探讨了Pinl在髓系、淋系十种恶性血液病细胞株以及正常人骨髓单个核细胞的表达情况,并分析了Pinl的表达与不同细胞周期的关系。方法:以10种恶性血液病细胞株(其中髓系白血病细胞株有:K562、HL-60、U-937、NB4、HEL、THP-1、Dami;淋系白血病细胞株有:6T-CEM、Jurkat;Raji为Burkitt淋巴瘤细胞株)和正常人骨髓单个核细胞为研究对象,利用Realtime-PCR检测白血病细胞株的Pinl表达。用Thymidine和Nocodazole将细胞阻断在不同的细胞周期并用流式细胞仪检测阻断效果,用Realtime—PCR及Western Blot的方法检测不同细胞周期的细胞中Pinl mRNA和蛋白的表达水平。结果:Pinl在恶性血液病细胞株中mRNA的表达水平明显高于正常人骨髓单个核细胞(F=10.508,P<0.01),其在髓系血液病细胞株和淋系恶性血液病细胞株中的表达均较正常人骨髓单个核细胞明显增高(分别为F=13.584,P<0.01:F=5.339,P<0.05)。髓系恶性血液病细胞株和淋系恶性血液病细胞株PinlmRNA表达水平的差别无统计学意义(F=0.616,P>0.05)。通过流式细胞仪检测细胞同步化的效果,细胞被分别阻断在G1/S期、S期和M期,Pinl在G1期mRNA的表达水平显著高于S期(F=40.572,P<0.05),S期与M期比较没有明显差异(F=8.309,P>0.05),但在蛋白水平Pinl的变化不明显,仅在M期略有上升的趋势。结论:PinlmRNA在恶性血液病细胞株中呈高表达:其表达水平与细胞周期有关,其中以G1期为最高,S期最低。更多还原