NF-κB抑制剂PDTC可促进人巨细胞病毒对骨髓间充质干细胞的感染

【作者】 魏国庆； 林茂芳； 黄河； 蔡真；

【机构】 浙江大学医学院附属第一医院骨髓移植中心；

【摘要】 目的:探讨人巨细胞病毒(CMV)对骨髓间充质干细胞(MSCs)的感染及核因子-κB(NF-κB)抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)对其感染的影响。方法:以1TCID50滴度的CMV作用于MSCs后,换新鲜含10%血清培养基(联用/不联用1μmol/L的PDTC)继续培养48h,倒置显微镜观察细胞形态,透射电镜检测细胞内CMV病毒颗粒,RT-PCR法检测细胞CMV即刻早期抗原基因(IE)mRNA、内参照甘油醛3-磷酸脱氢酶基因(GAPDH)mRNA的表达,流式细胞仪检测检测CMVpp65抗原表达。结果:(1)未经CMV处理及单独应用PDTC处理的MSCs细胞形态呈梭形,CMV处理的MSCs部分细胞形态由梭形逐渐膨胀、变粗,长臂逐渐缩短,而经CMV处理后联用PDTC作用的MSCs形态变化更明显,均由梭形逐渐膨胀、变粗、变圆、甚至脱壁:(2)透射电镜下,CMV处理的MSCs细胞内可见到CMV病毒颗粒,而经CMV处理后联用PDTC作用的MSCs细胞内可见到大量CMV病毒颗粒:(3)与未经CMV处理的MSCs相比,CMV处理的MSCs出现IE mRNA表达条带,而联用PDTC处理的MSCs的IE mRNA条带更清晰:(4)流式细胞仪检测发现,单用CMV处理的MSCs有7.17%的细胞表达CMVpp65抗原,而CMV联用PDTC处理的MSCs有18.36%的细胞表达CMVpp65抗原。结论:CMV在体外可明显感染MSCs,并在其中活化复制,而且NF-κB抑制剂PDTC可明显促进CMV对MSCs的感染及其活化。更多还原