牛膝多糖对CD4~+T细胞的诱导和分化作用研究

【作者】 季敬璋； 吕建新； 陆永绥；

【机构】 温州医学院检验医学院细胞与分子医学研究所；

【摘要】 目的:探讨牛膝多糖免疫调节作用的机制。方法:1.以牛膝多糖(800mg/L)分别对哮喘和肺癌病人的PBMC进行体外诱导培养,在18h以RT-PCR检测IFN-γ和IL-4mRNA的表达。2.用牛膝多糖在不同时间内和不同剂量分别对Th细胞进行体外诱导其分化,并分别收集细胞悬液和抽提细胞中RNA,分别采用RT-PCR和ELISA检测Th细胞所分泌的IFN-γ和IL-4的含量。结果:1.哮喘和肺癌患者PBMC中代表Th1的IFN-γmRNA表达率分别由6/25升到14.25(P<0.01)、3/22升到10/22(P<0.05),而代表Th2型的IL-4mRNA的表达率由17/25降到9/25(P<0.05)、14/22降到5/22(P<0.05)。2.(1)Th细胞培养至6h,可以检测到IFN-γmRNA的分泌,18h达到高峰,之后迅速下降,48h降至难以检出的水平。而对于IL-4,却无法检测到其mRNA 的分泌,处于一种抑制状况。(2)随着时间延长,IFN-γ蛋白分泌量逐渐升高,从18h-24h时段开始,蛋白分泌量开始显著增加(P<0.05),但在24h、36h和48h的三个时段内,蛋白分泌量增加不明显(P>0.05),进入平台期。IL-4蛋白分泌量对照组低。并亦处于一种抑制状况。3.(1)在18h时,IFN-γmRNA分泌量与ABPS的诱导浓度相关(r=0.979)。400mg/L和800mg/L是较好的的诱导浓度。(2)在48h时,IFN-γ蛋白表达量与ABPS的诱导浓度相关(r=0.979)。400mg/L和800mg/L是较好的的诱导浓度。实验组IL-4蛋白表达处于一种抑制状况。结论:1.应用ABPS能初步纠正肺癌和哮喘患者Th1和Th2细胞因子的失平衡。2.ABPS能在转录水平和翻译水平促进Th1类细胞因子的分泌,而抑制Th2类细胞因子的分泌。更多还原