人抵抗素基因表达水平的荧光定量测定及其初步应用

【作者】 罗招凡； 雷娟； 李芳萍； 程桦；

【机构】 中山大学第二附属医院检验科；

【摘要】 目的建立人抵抗素(Resistin)mRNA荧光定量检测方法。并比较冠心病患者和健康体检者外周血单个核细胞(PBMC)中的Resistin基因表达水平差异。方法基于Taqman荧光探针技术。构建克隆载体pMD18-T-resistin作为定量模板.在ABI-7000型PCR仪上通过荧光强度达到一定阈值时循环数来定量模板.以建立实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)方法,并对30名冠心病患者和30名健康体检者外周血Resistin mRNA进行检测。结果Resistin标准曲线范围为103～108拷贝/μl(r=0.993),内参三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)标准曲线范围为103～108拷贝/μl(r=0.998)。冠心病组外周血PBMC中的Resistin mRNA表达显著高于健康体检组(p<0.01)。结论成功建立人Resistin mRNA表达的FQ-PCR检测方法。Resistin可能作为炎症因子参与了冠心病动脉粥样硬化的发生发展。更多还原