经序贯处理的人肝胚瘤细胞株HepG2.2.15细胞HBV复制的研究

【作者】 管世鹤； 卢银平； 刘华平； 杨东亮； 陆蒙吉；

【机构】 安徽医科大学第一附属医院检验科；

【摘要】 目的了解经抗病毒核苷类似物拉米夫定(Lamivudine,3TC)和干扰素(IFN)序贯处理的人肝胚瘤细胞株HepG2.2.15细胞的HBV复制情况。方法用不同浓度梯度(0.04μM～125μM)的3TC连续处理HepG2.2.15细胞7d,补充1,000 IU/ml IFN-α联合处理3d;停止3TC处理,再单独以1,000 IU/ml IFN-α连续处理细胞10d;分别用免疫ELISA法、Dot blot和Southern blot杂交分析不同处理时期、不同处理组HepG2.2.15细胞分泌的HBV抗原、细胞外HBV DNA、胞内复制中间体HBV DNA等指标以判断HBV复制情况。结果ELISA、Dot blot、Southern blot分析提示3TC连续处理至10d时,HepG2.2.15细胞分泌的HBV抗原显著减少;细胞外HBV DNA和细胞内复制中间体HBV DNA不能被检测出,即HBV复制被显著抑制。有意义的是,停止3TC处理并代之以1,000 IU/ml IFN-α单独处理10d,在不同处理组,均有细胞内复制中间体HBV DNA的出现,且细胞外HBV抗原和HBV DNA恢复表达;即HBV颗粒在HepG2.2.15细胞内又重新恢复复制状态并分泌出细胞外。结论在体外细胞模型中,3TC连续处理HepG2.2.15细胞10d,细胞HBV复制被完全抑制;而经3TC/IFN序贯处理和IFN单独处理的HepG2.2.15细胞,不能有效地抑制HBV复制。更多还原