XE-2100血液分析仪提示的嗜酸性粒细胞异常散点图报警信息与疟原虫感染间的关系

【作者】 戴燕； 李冬； 周宏； 郑伟萍； 万海英；

【机构】 同济大学附属同济医院检验科；

【摘要】 目的利用对全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid.ATRA)敏感的急性早幼粒白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)细胞株NB4细胞为模型,研究尿多酸肽(cell differentiation agent,CDA-2)抑制白血病细胞的作用及其机制。方法CDA2作用NB4细胞不同时间后观察细胞形态变化:利用流式细胞仪观察CDA-2作用后NB4细胞表面分化抗原、DNA含量分布以及annexin V的改变:DNA ladder实验检测CDA-2作用后NB4细胞核DNA的降解情况:RT-PCR法检测凋亡抑制因子survivin的表达。结果1、将NB4细胞用10mg/L CDA-2处理至96h,可见NB4细胞体积变小,核浆比例降低,核凹陷,胞质出现粗大颗粒等部分分化特征,同时也可见部分细胞发生凋亡。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状并可见凋亡小体,96h这种变化更加明显。2、通过流式细胞仪对NB4细胞表面抗原表达进行检测.发现经CDA-2诱导后.NB4细胞表面抗原CD11C的阳性率明显升高(与不处理组比较,CD11C阳性率由14.32.30%升高至96h的96.62.40%,p<0.05);对细胞内DNA分布情况检测,发现亚G1期细胞数量呈时间依赖的方式增长(与不处理组比较.亚G1期细胞数量4.20.50%升高至96h的78.62.8%,p<0.05):随着CDA-2诱导时间的延长.Annexin V阳性的细胞数也逐渐增加.即凋亡细胞逐渐增加(与不处理组比较.Annexin V阳性率从3.70.34%升高至96h的66.13.2%.p<0.05)。3、我们抽提出经CDA-2处理过的不同时相(24h、48h、96h)NB4细胞的基因组DNA,经琼脂糖凝胶电泳分离后可观察到有凋亡特异的DNA ladder出现,并可见其DNA降解逐渐增多。4、CDA-2可下调NB4细胞survivin基因的表达,在作用96h后,基本检测不出。结论CDA-2可诱导NB4细胞发生分化和凋亡:CDA-2可能通过下调凋亡抑制因子survivin的表达.促进白血病细胞凋亡。更多还原