动脉粥样硬化危险因素糖尿病线粒体复合体Ⅰ活性动力学研究

【作者】 刘松梅； 周新； 庞志宇； 谢焱； 郑璇；

【机构】 武汉大学中南医院基因诊断中心；

【摘要】 目的以外周血为标本,建立线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性动力学检测方法学,并以T2DM为对象初步进行临床应用。方法:首先以淋巴细胞分层液分离外周血淋巴细胞,再以差速离心法分离线粒体,通过透射电子显微镜观察分离的线粒体形态,证实提取物为线粒体;Brandford方法测定线粒体蛋白质浓度;通过观察272-247nm波长处吸光度的变化反映氧化型葵基泛醌(DB)量的减少,观察复合体Ⅰ活性动力学;并对18例T2DM进行了初步临床应用。结果:从外周血淋巴细胞中成功地提取了线粒体,线粒体蛋白质浓度为0.02822±0.0066mg/ml,272-247nm波长的△OD值在1min内随着时间的延长呈增加趋势;T2DM组(72.37±10.15 nmol/min/mg蛋白质)复合体Ⅰ活性明显低于正常对照组(91.73±13.65 nmol/min/mg蛋白质),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:成功地建立了以外周血为标本,检测线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性动力学的方法学,并发现T2DM患者的复合体Ⅰ活性降低。更多还原