OCTN2在人类附睾中的表达及意义

【作者】 龚东明； 李铮； 朱晓斌； 刘玉林； 曹小蓉； 刘勇； 王益鑫； 黄翼然； 郑敏； 周玉传； 刘强； 刘爱华； 张永莲；

【机构】 上海交通大学医学院附属仁济医院泌尿外科上海市人类精子库； 中国科学院上海生命科学研究院生化与细胞生物学研究所；

【摘要】 <正>目的：研究有机阳离子转运子2(organic cation/canitine transportor 2,OCTN2或 SLC22A5)在人类附睾中的表达,探讨附睾肉碱转运机制,为临床男性不育的诊断与治疗及男性避孕节育新技术的研究提供理论依据。方法：获取人附睾组织标本分头、体、尾,抽提 RNA,根据人 OCTN2cDNA 全长序列设计引物并分别引入 BamH Ⅰ、EcoR Ⅰ酶切位点,行 RT-PCR 扩增产物；以 BamH Ⅰ和 EcoR Ⅰ分别酶切 PCR 产物和质粒 PGEX-2T 后回收,连接并转化 DH5α,筛选重组子 PGEX-2T-OCTN2以酶切图谱和 DNA 序列测定鉴定插入片段；以 PGEX-2T-OCTN2转化大肠杆菌 BL21(DE3),加入 IPTG 诱导蛋白表达,经鉴定后大量诱导表更多还原