氯化钴对RNA干扰食管鳞癌细胞HIF-1α基因表达及功能的影响

【作者】 张捷； 施瑞华； 肖斌； 杜琰萍； 张国新； 郝波；

【机构】 南京医科大学第一附属医院消化内科；

【摘要】 <正>目的研究氯化钴模拟缺氧对 RNA 干扰的缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因表达及功能的影响, 观察在人食管鳞癌细胞系 Eca-109中 RNA 干扰抑制 HIF-1α的效果。方法选择4组细胞,1组为食管癌 Eca-109细胞(A 组),2～4组为 RNA 干扰 HIF-1α后筛选出的3株细胞(本实验室编号分别为 H2/14号、H3/15号、H2/20号细胞),分别用200、400、600、800μM 氯化钴模拟缺氧,缺氧培养时间分别为12、24、48、72h,采用 Western blot 和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测 HIF-1α蛋白及 mRNA 表达,同时 Western blot 检测血红素加氧酶(Hemeoxygenase-1,HO-1)、基质金属蛋白酶-2 (Matrix metallopmteinase-2,MMP-2)、葡萄糖转运体-1(Glucose transporter-1,Glut-1)、P53等相关基因的表达。结果 4组细胞 HIF-1α蛋白表达均随氯化钴浓度加大而增加,常氧与400μM 氯化钴处理更多还原