组织工程肝构建的实验研究

【作者】 迟宝荣； 孟祥伟； 孙艳； 胡春光； 姜金兰；

【机构】 吉林大学第一医院消化内科； 吉林大学再生医学科学研究所；

【摘要】 <正>目的探讨以猪脾脏为载体组织工程肝组织的构建。方法 (1)应用克隆的人肝细胞生长因子 (hHGF)cDNA,构建重组 AcMNPV/hHGF,建立 AcMNPV/hHGF/Sf9昆虫细胞的 rhHGF 表达体系和提纯方法。(2)组织工程肝脏前驱细胞的分离培养采用 Seglen 法基础上略加改进的两步原位灌流法分离猪肝细胞,在 rhHGF 的作用下行猪肝细胞平面培养及球形聚集培养。(3)将猪自体肝细胞脾内移植,通过对术后不同时间点脾脏标本的组织学和超微结构动态观察及脾脏组织匀浆液中 ALT 活性的测定,了解组织工程肝组织在脾脏内的形成过程。结果 (1)表达合成的 rhHGF 为成熟型 rhHGF,纯度达98%以上,更多还原