Caveolin-1对喉鳞状细胞癌生物学特性的影响

【作者】 顾栋桦； 唐峰； 王震； 李华； 陈琦； 朱虹光；

【机构】 复旦大学上海医学院病理学系； 复旦大学附属华山医院病理科；

【摘要】 目的探讨 caveolin-1对喉鳞状细胞癌生物学特征的影响。方法构建 caveolin-1真核表达质粒,用脂质体法转染喉鳞癌细胞株 HEp2 细胞,筛选出稳定高表达 caveolin-1的克隆,并用实时荧光定量 PCR 和免疫印迹法鉴定。MMT 法用于检测细胞的生长能力,软琼脂克隆形成实验用于检测细胞锚定非依赖性生长能力,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡,免疫印迹法检测表皮生长因子（EGFR）、细胞外信号调节激酶 （ERK1/2）的磷酸化水平,用激光共聚焦显微镜观察 caveolin-1和 EGFR 的共定位。结果成功构建了 caveolin-1真核表达质粒,转染 HEp2细胞后筛选得到3株稳定高表达 caveolin-1的克隆。与对照组相比,转染后的细胞生长速度明显减慢, 软琼脂中克隆形成能力明显下降。流式细胞仪结果显示高表达 caveolin-1可使细胞阻滞在 G₀/G₁ 期并且促进细胞的凋亡。激光共聚焦显微镜观察显示 caveolin-1与 EGFR 共定位于细胞膜。免疫印迹检测发现 caveolin-1能降低 EGFR 和 Erk1/2 的磷酸化水平。结论 caveolin-1能够抑制喉鳞癌细胞株 HEp2的生长,促进凋亡；对 EGFR-MAPK 信号通路的负性调节可能在其抑癌机制中发挥重要作用。更多还原