Smad7对TGFβ1诱导的肺泡上皮细胞向间质细胞转变的影响

【作者】 徐国萍； 陈琦； 许祖德；

【机构】 复旦大学上海医学院病理系；

【摘要】 目的检测 TGFβ 1能否在体外诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞向间质细胞转变 (epithelial-mesenchymal transition,EMT),以及 Smad7基因转染能否阻止此种转变及相关信号转导机制。方法采用脂质体法转染 Smad7基因到大鼠肺泡Ⅱ型上皮(RLE-6TN)：Real-time PCR 及蛋白印迹法检测转染前后上皮细胞标志物 (E-cadherin,CK19)、间质细胞标志物(FN, Vimentin)及 Smad 信号通路相关蛋白表达变化；相差显微镜观察 TGFβ 1诱导的肺泡上皮细胞形态改变,其超微结构改变采用透射电镜观察。结果成功转染 Smad7到 RLE-6TN；转染前,在 TGFβ 1作用下,RLE-6TN 间质标志物的表达在 mRNA 和蛋白水平上调,而上皮标志物表达下调；转染后,其间质标志物下调的同时上皮标志物上调；转染前 RLE-6TN 在 TGFβ 1作用下 p-Smad2/3 表达上调,转染后其表达无明显改变；形态学上, TGFβ 1能诱导肺泡上皮发生 EMT,Smad7转染则能阻止 EMT；超微结构上,TGFβ 1能诱导肺泡上皮特有板层小体变性、肿胀并随其时间延长最终完全消失。结论 TGFβ 1能在体外诱导肺泡Ⅱ型上皮向间质细胞转变,其机制部分与 Smad 信号转导途径相关,Smad7转染能在一定程度上阻止该转变。更多还原