脑血灵颗粒剂对实验性脑出血大鼠脑细胞凋亡及Bcl-2、Caspase-3表达的影响

【作者】 郑安； 叶钦勇； 林求诚； 黄华品； 刘楠；

【机构】 福建省医科大学附属协和医院神经内科； 福建省中医药研究院；

【摘要】 目的:神经元细胞凋亡在脑出血的继发性神经损伤机制中有重要作用,而细胞凋亡从凋亡基因的启动到神经元死亡有一个较长的时间过程。因此通过抑制神经元凋亡防治脑出血后继发性神经元损伤将成为研究脑保护的热点。本研究观察了脑血灵颗粒对脑出血大鼠脑细胞凋亡及Bcl-2、Caspase-3表达的影响。方法:以自体血制作大鼠脑出血模型,大鼠随机分4组,每组10只,脑血灵颗粒治疗组(0．84g／kg,按体表面积计算相当于70kg成年人临床生药用量的2倍)、华佗再造丸对照组(1．6g／kg)、模型对照组(等容积生理盐水)、假手术组(等容积生理盐水)。通过TUNEL法检测原位凋亡细胞,免疫组化、原位杂交、Western-blot检测Bcl-2、Caspase-3等凋亡相关基因的表达。结果:假手术组存在少量的TUNEL阳性细胞表达, 系正常生理过程中的神经元退化。造模后7天其余各组血肿周围脑组织TUNEL阳性细胞表达均明显增多。与模型对照组比较,脑血灵治疗组、华佗再造丸组均可以明显减少TUNEL阳性细胞数(P值均<0．01),脑血灵治疗组的降低幅度优于华佗再造丸组(P值为0．043)。假手术组可见Bcl-2阳性细胞表达,造模后7天各组血肿周围脑组织Bcl-2阳性细胞表达均明显减少,三组之间以模型对照组下降幅度最为显著,而脑血灵治疗组与华佗再造丸组之间存在显著性区别。假手术组可见极少量的Caspase-3阳性细胞表达,造模后7天各组血肿周围脑组织Caspase-3阳性细胞表达均明显上升,与模型对照组比较,脑血灵治疗组、华佗再造丸组均可以明显减轻Caspase-3阳性细胞的上升幅度(P值分别为0．000,0．021),脑血灵治疗组的降低幅度优于华佗再造丸组(P值为0．023)。结论:脑血灵颗粒剂对Bcl-2及Caspase-3具有显著的双向调节作用,它既能能上调Bcl-2表达,从而阻断细胞凋亡的早期环节;又能下调Caspase-3表达,阻止凋亡进入最后的不可逆阶段。对凋亡的早期和终末环节均有显著的抑制作用,从而最终减少凋亡的发生,促进脑出血后脑内神经元的存活及损伤的修复。这是脑血灵颗粒剂保护出血后继发性神经元损伤的重要药理学基础。更多还原