开颅去骨瓣减压治疗恶性大脑中动脉梗死的实验研究

【作者】 赵湛； 曾进胜； 熊丽；

【机构】 中山大学附属一院；

【摘要】 目的:比较大鼠实验性大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)后不同时间点开颅手术及术中去除不同尺径大小骨瓣的疗效。探讨神经可塑性是否与不同时间点手术后神经功能康复的差异相关。方法:健康雄性SD大鼠248只,双肾双夹法复制易卒中型肾血管性高血压大鼠(stroke prone renovascular hypertensive rats,RHRSP)。双肾双夹术后12周,血压>180mmHg,无自发性卒中症状的大鼠线拴法复制左侧MCAO模型。MCAO模型复制成功后,大鼠随机分为 5组:假手术对照组、1小时手术组、4小时手术组、12小时手术组和24小时手术组。假手术对照组大鼠40只,各手术组大鼠52只,其中26只为大骨瓣亚组,26只为小骨瓣亚组。假手术对照组不做开颅手术。1、4、12和24小时手术组大鼠分别于 MCAO后1、4、12和24小时行开颅去骨瓣减压术,各大骨瓣亚组大鼠术中去除长轴1cm,短轴0．5cm的椭圆形骨瓣,小骨瓣亚组去除直径0．5cm的圆形骨瓣。术后纪录各组大鼠病死率,观察死亡大鼠的开颅相关性出血发生情况。MCAO后第1、 2、4、8周为手术疗效观察时间点。每一观察时间点分别于每组中随机选择10-11只大鼠进行病理取材,另随机选择5-6只大鼠进行western blotting取材,取材前对选出的大鼠进行神经功能评分,取材时观察有无开颅相关性出血。病理取材用大鼠4％多聚甲醛心脏灌注,连续冠状石蜡切片,HE染色计算脑梗塞体积,免疫组织化学法测定梗塞灶周边组织内的微管相关蛋白2(microtubule-associated protein 2,MAP2)和突触囊泡蛋白(synaptophysin,SYN)的表达量。Western blotting取材用大鼠生理盐水心腔灌注,快速断头取脑,组织匀浆,western-blotting定量检测脑梗塞灶周边组织内MAP2和SYN的蛋白表达量。全部数据均使用SPSS 11．0进行统计分析,P<0．05时有统计学意义。结果:各组大鼠死亡均见于MCAO后28-72小时。1、4、12、24小时手术组和假手术对照组的病死率分别为13．5％、13．5％、17．3％、28．8％和52．5％,各手术组与对照组比较均有显著性差异(P<0．05)。各手术组间差异无显著性意义(P>0．05)。1、4、12小时手术组,MCAO后第1、2、4、8周的神经功能评分均优于假手术对照组;24小时手术组MCAO后第1、2周的神经功能评分与对照组比较无显著性差异(P>0．05),第 4、8周与对照组比较有显著性差异(P<0．05),与其他3个手术组比较则无显著性差异(P>0．05)。,各手术组的梗塞灶体积于 MCAO后第1、2、4、8周均小于假手术对照组(P<0．05),其中1、4、12小时手术组梗塞灶体积分别小于24小时手术组(P< 0．05)。1、4小时手术组的大小骨瓣亚组,大鼠病死率、MCAO后1、2、4、8周的神经功能评分和梗塞灶体积均无显著性差异 (P>0．05)。12、24小时手术组的大小骨瓣亚组,大鼠病死率无显著性差异(P>0．05),MCAO后第1、2周的神经功能评分和梗塞灶体积大骨瓣亚组优于小骨瓣亚组(P<0．05)。MCAO后第4、8周两手术组的亚组间神经功能评分比较无显著差异(P> 0．05),但24小时手术组的两亚组间的梗塞灶体积差异持续至MCAO后第4、8周(P<0．05)。手术组大鼠中,5．3％(11／208) 发生开颅相关性出血,其中大、小骨瓣亚组的发生率分别为1．0％(1／104)和9．6％(10／104),差异有显著性意义(P<0．05)。 MCAO后各手术组大鼠的梗塞灶周边脑组织内的MAP2、SYN的表达量均增高,表达高峰持续至MCAO后第2周,MCAO 后第4、8周表达量逐渐下降。1、4、12、24小时手术组MCAO后各周的MAP2、SYN表达量比较均无显著差异(P>0．05)。结论:MCAO后24小时内不同时间点开颅手术均可降低实验性MCAO大鼠的病死率,表明去骨瓣减压是抢救恶性大脑中动脉梗死的有效办法。与24小时手术组相比,1、4、12小时组的梗塞灶较小、神经功能康复更佳,提示早期手术有更好疗效。去除不同大小骨瓣对1、4小时手术组的疗效无明显影响,12、24小时手术组术中去除小骨瓣对疗效产生不利影响,并且开颅相关性出血的发生率显著增高。未发现早期手术组的神经功能康复较好与MAP2和SYN的表达相关。更多还原