NURR1基因转染C17.2神经干细胞移植治疗实验性局灶性脑缺血(摘要)

【作者】 黎祥喷； 邢诒刚；

【机构】 中山大学第二附属医院神经科；

【摘要】 方法:用线栓法建立右侧SD大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤模型(60minMCAO)。设置对照组,C17．2神经干细胞移植组,Ad-NURR1+C17．2神经干细胞移植组3组;分1周(8只),2周(8只),1月(8只),6月(2只)4个时间点。C17．2 和NURR1基因修饰C17．2神经干细胞脑内移植,移植部位选为缺血半暗带。分别在移植前1天,移植后1周、2周、1月、6 月进行Modified Neurological Severity Score Point(mNSS)评分。4时间点mNSS评分后将实验动物断头取脑。前3个时间点各取2只大鼠经注射针道行冰冻切片,作荧光示踪实验;余每组6只行石蜡切片,NSE免疫组化染色。第4时间点各2只行石蜡切片,苏木素-伊红染色(hemotoxylin-eosin,H．E),镜下组织学检查。结果:①C17．2、pAdeasy-NURR1+C17．2神经干细胞移植至模型缺血半暗带后1周,2周和1月后,实验动物神经功能缺损均有改善,mNSS评分减少,P<0．05:pAdeasy- NURR1+C17．2移植组较单纯C17．2移植组改善更为明显,P<0．05。②C17．2、pAdeasy-NURR1+C17．2神经干细胞移植至模型缺血半暗带后1周,荧光显微镜下观察供体细胞存活和移行情况,见供体细胞存活并开始向注射针道周围神经组织移行。1月后,供体细胞移行更远,以向梗塞灶方向移行较为明显,部分细胞可见突触样结构形成。③C17．2、pAdeasy-NURR1+ C17．2神经干细胞移植至模型缺血半暗带后1周,注射针道周围NSE免疫组化检测阳性细胞率无显著差异,P>0．05。2周和 1月后,pAdeasy-NURR1+C17．2组较C17．2移植组NSE阳性细胞率明显增高,P<0．05。④C17．2、pAdeasy-NURR1+C17．2 神经干细胞移植至模型缺血半暗带后半年,组织学检查未见异常细胞增生。结论:NURR1基因修饰神经干细胞移植治疗局灶性脑梗死,能显著改善实验动物的神经功能缺损。C17．2和NURR1基因转染C17．2神经干细胞移植至局灶性脑梗死模型缺血半暗带后,其原代或子代细胞能向周围脑组织移行,并可见与宿主神经细胞形成突触联系。其中似以NURR1基因修饰 C17．2神经干细胞移植组移行更为明显。NURR1基因转染C17．2神经干细胞移植至局灶性脑梗死模型缺血半暗带后,能促进神经干细胞向神经元方向分化。移植半年后移植部位未见异常细胞增生。更多还原