应用内皮祖细胞构建组织工程瓣膜的可行性研究

【作者】 张怀勤； 肖刚峰； 孙成超； 杨德业； 徐力辛； 黄伟剑； 林捷；

【机构】 浙江省温州市温州医学院附属第一医院心内科；

【摘要】 <正>目的探索建立一套可靠稳定的体外培养、扩增鉴定脐血和外周血内皮祖细胞(EPCs)的方法,探讨利用EPCs进行体外再内皮化去细胞生物瓣制备组织工程瓣膜的可行性。方法采用密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,贴壁筛选法培养内皮祖细胞。分别采用流式细胞术分析培养细胞CD34、VE-Cadherin、 VEGFR-2及CD133的表达,DiI-ac—LDL吞噬试验、Ⅷ因子相关抗原免疫组化以及RT—PCR观察细胞eNOS 和ET-1的表达和NO浓度测定进一步证实培养细胞的内皮属性。采用酶-去垢剂法去除新鲜猪主动脉瓣细胞制备去细胞瓣膜支架,采用常规组织切片HE、Masson染色及扫描电镜检评价去细胞效果及纤维支架完更多还原