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Surviving-Fk质粒的构建及诱导树突状细胞抗肝癌的免疫研究
【机构】 武汉大学人民医院感染科；
【摘要】 <正>目的:检测Survivin-FK基因治疗小鼠肝癌的效果和对机体免疫系统的影响。方法:将FK-cDNA插入 pcDNA3．1质粒的多克隆位点,用Survivin基因启动子替代pcDNA3．1质粒的CMV启动子,构建成Survivin- Fk重组质粒。用脂质体法将Sur-Fk基因转染到H22肝癌细胞;用RT-PCR和Western blot检测转染的效果, 并进行转基因瘤细胞的成瘤性实验,观察肿瘤的生长情况及小鼠的生存时间并测量肿瘤大小;并且切取肿瘤组织,经过处理后,用流式细胞仪分析肿瘤周围DC细胞表面MHC-Ⅰ／Ⅱ表达情况。结果:构建得到的重组质粒Sur-Fk质粒,用ApaI和EcoRI酶切鉴定,琼脂糖电泳鉴定,得到相应的特异片段,提示Sur-Fk质粒重组质粒构建成功;转基因瘤细胞的成瘤实验中,H22-SUR-FK组的肿瘤大小为(0．3±0．13)cm3,小鼠的生存时间40、70、100d以内分别有2、3、15只小鼠,在肿瘤大小和小鼠的生存时间方面,H22-SUR-FK组与H22
- 【会议录名称】 第五届全国肝脏疾病临床暨中华肝脏病杂志成立十周年学术会议论文汇编
- 【会议名称】第五届全国肝脏疾病临床暨中华肝脏病杂志成立十周年学术会议
- 【会议时间】2006-05
- 【会议地点】中国辽宁大连
- 【分类号】R735.7
- 【主办单位】中华医学会肝病学分会、中华肝脏病杂志编辑委员会