可溶性TGF β1 Ⅱ型受体逆转录病毒表达载体对TIMPs的抑制作用

【作者】 高巍； 聂青和； 周永兴； 张惠中；

【机构】 第四军医大学唐都医院消化内科； 第四军医大学唐都医院传染病科、全军感染病诊疗中心； 第四军医大学唐都医院中心实验室；

【摘要】 <正>目的:构建表达人转化生长因子-β1(TGF β1)Ⅱ型受体细胞外结合区和人IgG1 Fc的融合蛋白逆转录病毒载体,并研究了重组质粒pL(T β RⅡ-IgG1 Fc)SN是否对肝细胞分泌金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs) 有抑制作用,从而为该载体治疗肝纤维化的临床应用提供理论依据。方法:以RT-PCR方法扩增目的基因T β RⅡ-IgG1 Fc,扩增产物纯化后克隆至测序载体pGEM-T-Easy,挑取阳性克隆酶切鉴定后测序;利用重组 DNA技术,将T β RⅡ-IgG1 Fc基因亚克隆至逆转录病毒载体pLXSN中,重组质粒pL(T β RⅡ-IgG1 Fc) SN在脂质体介导下转染PA317包装细胞,G418筛选,直至出现抗性克隆,扩大培养,测定病毒滴度。以人正更多还原