丙型肝炎病毒p7蛋白反式调节基因p7TP2的克隆化及生物信息学分析

【作者】 袁菊； 郭江； 成军； 陶明亮； 蓝贤勇； 洪源； 靳亚平； 毛羽；

【机构】 北京地坛医院传染病研究所；

【摘要】 <正>目的:克隆丙型肝炎病毒(HCV)p7蛋白反式调节未知功能新基因p7TP2,构建其真核表达载体,并应用生物信息学初步探讨其结构及功能。方法:应用PCR技术从HepG2细胞提取的cDNA扩增p7TP2基因,选用 pGEM-T载体进行TA克隆,通过P C R、限制性酶切分析及测序进行鉴定,再将其亚克隆到真核表达载体 pcDNATM3．1／myc-His A,通过PCR、限制酶切分析进行鉴定,并应用生物信息学初步分析其物理化学性质、蛋白质结构域、功能及染色体定位。结果:成功从HepG2细胞提取并逆转录的cDNA中扩增出p7TP2基因,编码区为495核苷酸(nt),编码产物为164氨基酸残基(aa),经核苷酸序列数据库(GenBank)同源序列的搜寻,更多还原