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人DC-SIGN真核表达载体的构建及在K-562细胞中的表达
【机构】 第四军医大学唐都医院传染病科、全军感染病诊疗中心;
【摘要】 <正>目的:构建含人DC-SIGN基因的真核表达载体,探讨DC-SIGN在K-562细胞中的表达,为研究丙型肝炎病毒(HCV)与DC-SIGN的相互作用奠定基础。方法:分离人外周血单个核细胞(PBMC),体外诱导分化为树突状细胞(DC);提取细胞总RNA并逆转录为cDNA,设计上下游引物,利用PCR技术扩增DC-SIGN 片段,连接入克隆载体pGEM-T easy;应用双酶切回收基因片段,定向克隆人真核表达载体pCDNA3.1;通过脂质体介导的基因转染技术将pCDNA3.1-DC-SIGN和空载体转入K-562细胞,应用G-418筛选稳定表达
- 【会议录名称】 第五届全国肝脏疾病临床暨中华肝脏病杂志成立十周年学术会议论文汇编
- 【会议名称】第五届全国肝脏疾病临床暨中华肝脏病杂志成立十周年学术会议
- 【会议时间】2006-05
- 【会议地点】中国辽宁大连
- 【分类号】R346
- 【主办单位】中华医学会肝病学分会、中华肝脏病杂志编辑委员会