pemt2-cDNA转染抑制大鼠肝癌CBRH-7919细胞周期相关蛋白的表达

【作者】 刘翠平； 邹伟； 王亮； 崔肇春；

【机构】 辽宁师范大学； 大连医科大学；

【摘要】 目的探讨磷脂酰乙醇胺-N-甲基转移酶2(PEMT2)的转染抑制肝癌细胞增殖的分子机制。方法将带有完整 pemt2-cDNA的质粒转入大鼠肝癌CBRH-7919细胞,筛选出稳定传代并高表达PEMT2的细胞株,用免疫印迹杂交技术比较了细胞周期调控因子cyclinD1／CDK4、cyclinE／CDK2、pRb、caspase3、c-jun以及小窝蛋白caveolin的表达变化。结果CBRH- 7919细胞过表达PEMT2后,cyclin D1和cyclin E表达水平不受影响,而CDK4表达减少13％,CDK2表达减少33％,pRb 蛋白表达减少80％;与对照组相比凋亡执行蛋白caspase-3表达增加1．2倍,而原癌基因c-jun表达明显减少;小窝蛋白 caveolin-1和caveolin-2表达水平没有明显变化。结论pemt2-cDNA的转染可能通过降低CDK2的表达水平,使有活性的 cyclinE／CDK2复合物减少,进而影响pRb蛋白的磷酸化,抑制肝癌细胞由G1期进入S期,从而影响细胞周期进程,抑制肝癌细胞增殖。原癌基因c-jun的过度表达对肿瘤细胞的增殖是有利的,pemt2-cDNA的转染抑制了c-jun表达,激活了caspase3的表达,诱发细胞发生凋亡,这可能是pemt2抑制肝癌细胞增殖的机制之一。另外,PEMT2过表达后对细胞生长的影响不是通过小窝蛋白起作用的。更多还原