聚合酶链反应法检测氨基糖苷类修饰酶基因(10种)

【作者】 糜祖煌； 陆亚华； 黄支密； 秦玲； 韦昌谦；

【机构】 无锡市克隆遗传技术研究所； 苏州大学医学院附属第三医院； 解放军98医院；

【摘要】 <正> 目的应用聚合酶链反应(PCR)技术检测氨基糖苷类修饰酶(aminoglycoside-modifying enzymes,AMEs)基因。方法根据美国GenBank已登录AMEs基因序列,自行设计aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰ、aac(6′)-Ⅱ、ant(3″)-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ、aac(6′)/aph(2′)、aph(3′)-Ⅲ、ant(4′,4″)、ant(6)-Ⅰ等10种AMEs基因的PCR扩增引物和反应体系,并抽取各种靶基因阳性产物作产物直接DNA测序。结果耐氨基糖苷类药物的革兰阴性铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、阴汤肠杆菌分别检出aae(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰ、aac(6′)-Ⅱ、ant(3″)-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ等6种基因;更多还原