重组人源性抗HBsAg Fab抗体的酵母表达研究

【作者】 邓宁； 向军俭； 陈文吟； 粟宽源；

【机构】 暨南大学生命科学技术学院分子免疫学与抗体工程实验室； 中国人民解放军第458医院传染病中心；

【摘要】 <正> 乙型肝炎病毒不仅引起急慢性肝炎,且与肝硬化和肝癌的发生有密切的关系。现已公认针对乙肝表面抗原的抗体具有保护活性,是唯一能用于紧急预防的生物制品。本研究将噬菌体展示技术筛选的人源性抗HBsAg Fab抗体的轻、重链基因分别克隆到pPICZαA表达载体上,构建转化载体pPICZαA-L和pPICZαA-H,再将L链完整的表达盒与Fd链完整的表达盒克隆到同一个载体上,构建酵母双表达载体pPICZαA-H-L。电转化法转化GS115菌株,将Fab抗体的轻、重链基因分别整合到巴斯德毕赤酵母的染色体上构建高效分泌表达抗HBsAg Fab抗体的酵母工程菌。对表达的重组Fab抗体进行了离子交换纯化,对其分子量、等电点、糖基化以及抗原结合活性等特性进行了分析,并用5L发酵罐对人更多还原