携带HSV-TK基因的逆转录病毒载体的构建及其对T细胞的杀伤作用

【作者】 徐开林； 陈香梅； 潘秀英； 李振宇； 鹿群先； 李德鹏；

【机构】 徐州医学院附属医院血液科；

【摘要】 <正> 目的:探讨单纯疱疹病毒胸苷激酶(the herpes simplex virus thymidine kinase,HSV-TK)基因在小鼠脾细胞(T细胞)中表达的意义。方法:应用亚克隆技术将磷酸甘油酸激酶(phosphoglycerate kinase promoter,PGK)启动子和HSV-TK目的基因片段插入逆转录病毒载体pLXSN,将含HSV-TK基因的逆转录病毒感染小鼠脾细胞(T细胞),MTT法测定更昔洛韦(GCV)对转化细胞的抑制作用。结果:PCR法检测到HSV-TK基因在PA 317包装细胞和T细胞基因组内的整合,转导了HSV-TK基因的T细胞对GCV敏感。结论:逆转录病毒载体可有效介导HSV-TK自杀基因转移至T细胞,为自杀基因系统防治移植物抗宿主病(GVHD)的研究提供了实验依据。更多还原